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    細(xì)胞房設(shè)計(jì)

    來(lái)源:蘇州邁萊柏系統(tǒng)工程有限公司發(fā)布時(shí)間2021.09.16


    無(wú)菌操作區(qū)


    無(wú)菌操作區(qū)是只限于細(xì)胞培養(yǎng)及其他無(wú)菌操作的區(qū)域,最好能與外界隔離,不能穿行或受其他干擾。在一般環(huán)境的空氣中,由于存在許多塵埃和雜菌,較易造成污染。

    因此,接種工作要在空氣經(jīng)過(guò)滅菌的環(huán)境里進(jìn)行,小規(guī)模的無(wú)菌環(huán)境可利用超凈工作臺(tái)創(chuàng)造,大規(guī)模的需建無(wú)菌室。

    理想的無(wú)菌操作室應(yīng)劃為三部分∶

    1、更衣室:供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。

    2、緩沖間:位于更衣間與操作間之間,用于準(zhǔn)備工作,還有防止污染的作用,以保證操作間的無(wú)菌環(huán)境,同時(shí)可放置恒溫培養(yǎng)箱以及必需的小型儀器。

    3、無(wú)菌操作間:無(wú)菌操作間則專(zhuān)用于無(wú)菌操作、細(xì)胞培養(yǎng),其大小要適當(dāng),且其頂部不宜過(guò)高以保證紫外線(xiàn)的滅菌效果﹔墻壁光滑無(wú)死角以便清洗和消毒,無(wú)菌操作間容積小且為密閉式,一般無(wú)菌操作間的空氣消毒用紫外線(xiàn)燈,有的實(shí)驗(yàn)室使用無(wú)臭氧紫外線(xiàn)消毒器或電子消毒滅菌器。

    凈化工作臺(tái)∶操作簡(jiǎn)單,安裝方便,占用空間小且凈化效果很好。一般細(xì)菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺(tái)主要有兩種:(a)側(cè)流式或稱(chēng)垂直式(b)外流式或稱(chēng)水平層流式。


    孵育區(qū)

    孵育區(qū)也稱(chēng)培養(yǎng)區(qū),本區(qū)對(duì)無(wú)菌的要求雖不比無(wú)菌區(qū)嚴(yán)格,但仍需清潔無(wú)塵,因此也應(yīng)設(shè)置在干擾少而非來(lái)往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進(jìn)行,后者費(fèi)用高,一般實(shí)驗(yàn)室多采用孵箱進(jìn)行工作。


    制備區(qū)

    制備區(qū)主要進(jìn)行培養(yǎng)液及有關(guān)培養(yǎng)用的液體等的制備。應(yīng)設(shè)有試劑柜、器械柜、實(shí)驗(yàn)臺(tái)和上水道、電源等,配備的主要儀器設(shè)備有水純化裝置、天平、微波爐、pH計(jì)、抽氣泵、電爐、培養(yǎng)分裝器、各種規(guī)格的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、移液管、燒杯、量筒、容量瓶等。

    在有天平、pH計(jì)、磁力拌器等設(shè)備下完成制備以后,應(yīng)在無(wú)菌操作臺(tái)進(jìn)行過(guò)濾除菌。液體制備直接關(guān)系組織細(xì)胞養(yǎng)的成敗,因此必須嚴(yán)格無(wú)菌操作。


    儲(chǔ)藏區(qū)

    儲(chǔ)藏區(qū)主要存放各類(lèi)冰箱、干燥箱、液氫罐、無(wú)菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等,此環(huán)境也需要清潔無(wú)塵。為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氫溫度-196℃。

    細(xì)胞的凍存過(guò)程需要一系列程序降溫,一般為4℃下存放30min。轉(zhuǎn)放-20 ℃ 1 h,再轉(zhuǎn)入-80~-70℃過(guò)夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氫內(nèi)(-196℃)。因此儲(chǔ)存區(qū)必須配備冰箱、低溫冰箱、超低溫冰箱和液氫罐等設(shè)備。


    清潔和消毒滅菌區(qū)

    清潔和消毒滅菌區(qū)應(yīng)與其他區(qū)域分開(kāi),主要進(jìn)行所有細(xì)胞培養(yǎng)器皿的清洗、準(zhǔn)備、消毒及三蒸水制備等工作,應(yīng)備有高壓蒸汽滅菌鍋、細(xì)菌過(guò)濾設(shè)備、電熱干燥箱、消毒柜、排風(fēng)設(shè)備等。


    細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)要求

    環(huán)境要求

    溫度:儀器還是操作對(duì)溫度沒(méi)有特殊要求,維持舒適的溫度即可,比如18~26度。

    濕度:過(guò)高的濕度會(huì)導(dǎo)致微生物的滋生,所以建議正常維持濕度在70%以下。

    潔凈度:細(xì)胞實(shí)驗(yàn)對(duì)潔凈區(qū)并沒(méi)有要求,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)里面只有細(xì)胞操作的時(shí)候要求無(wú)菌的環(huán)境,這時(shí)要求有局部的百級(jí),通??梢岳贸瑑襞_(tái)或者生物安全柜來(lái)實(shí)現(xiàn),不過(guò)有時(shí)候?yàn)榱擞袀€(gè)更好一點(diǎn)的環(huán)境,減小超凈臺(tái)過(guò)濾器更換的時(shí)間,會(huì)維持室內(nèi)的潔凈度,比如萬(wàn)級(jí)的潔凈度。

    無(wú)菌無(wú)毒的操作環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境是保證細(xì)胞在體外培養(yǎng)成功的首要條件。細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無(wú)菌環(huán)境要求很高,在細(xì)胞操作時(shí),一般需要在100級(jí)空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行。

    在體外培養(yǎng)的細(xì)胞由于缺乏對(duì)微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物質(zhì)污染,或者自身代謝物質(zhì)積累,可導(dǎo)致細(xì)胞中毒死亡。

    照明︰滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)用的操作照度,通常在300LUX。

    維護(hù)結(jié)構(gòu)要求

    雖然實(shí)驗(yàn)的操作對(duì)大環(huán)境沒(méi)有特殊要求,不過(guò)最好能有不產(chǎn)塵、不積塵的環(huán)境,能保證室內(nèi)的清潔,并且易于清洗、不容易滋生微生物,所以在選擇維護(hù)結(jié)構(gòu)時(shí),選用彩鋼板、醫(yī)療板等潔凈板材是比較好的選擇,為了保證室內(nèi)的通透性,可以布置密閉窗。

    消毒

    通常做完實(shí)驗(yàn)后,都需要做終末消毒,室內(nèi)需要安裝紫外燈,利用紫外燈對(duì)空氣和表面消毒。


    細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的注意事項(xiàng)

    1、放置細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室,空調(diào)需要能保證在冬季能制冷,特別是在密閉的環(huán)境里,培養(yǎng)箱等設(shè)備的散熱量會(huì)比較大,導(dǎo)致室內(nèi)溫度過(guò)高。

    2、如果設(shè)計(jì)成凈化實(shí)驗(yàn)室,就需要按凈化實(shí)驗(yàn)室的要求去做,如果做的細(xì)胞涉及到生物安全,則必須按照生物安全實(shí)驗(yàn)室去設(shè)計(jì),具體根據(jù)所做實(shí)驗(yàn)的種類(lèi),來(lái)確定實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)要求以及選擇的設(shè)備,是選擇超凈工作臺(tái)還是生物安全柜。

    3、從事臨床細(xì)胞治療的,需要按照具體的規(guī)范要求建設(shè)。










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